Please use this identifier to cite or link to this item: https://ir.sc.mahidol.ac.th/handle/123456789/736
Title: การถ่ายยีนเข้าสู่ต้นเข้าพรรษาทางเงิน (Globba substrigosa) โดยใช้ Agrobacterium tumefaciens
Other Titles: Agrobacterium-mediated transformation of Globba substrigosa
Authors: งามนิจ ชื่นบุญงาม
Keywords: เข้าพรรษาทางการเงิน;การถ่ายยีนโดย Agrobacterium;pBl121;GUS;Globba substrigosa;Agrobacterium-mediated
Issue Date: 2010
Publisher: สมาคมพฤกษศาสตร์ในพระบรมราชินูปถัมภ์ และองค์การสวนพฤกษศาสตร์
Citation: วารสารพฤกษศาสตร์ไทย 2553;2(พิเศษ):155-162.
Abstract: ต้นเข้าพรรษาทางการเงิน (Globba substrigosa Wall. Ex Baker) เป็นพืชที่มีศักยภาพในการพัฒนาเป็นพืชเศรษฐกิจ แต่เนื่องจากยังไม่มีการศึกษาวิธีการที่เหมาะสมในการถ่ายยีนเข้าสู่ต้นเข้าพรรษาทางเงิน รายงานนี้จึงศึกษาความเหมาะสมของความเข้มข้นของ Agrobacterium tumefaciens สายพันธุ์ EHA105 และเวลาที่ใช้ในการปลูกถ่ายเชื้อเพื่อเป็นพื้นฐานในการพัฒนาการถ่ายยีนของต้นเข้าพรรษาทางการเงินต่อไป ในการศึกษานี้ใช้ A. tumefaciens ที่มีพลาสมิด pBI121 ซึ่งมียีน neomycin phosphotransferase (nptll) เป็นยีนเครื่องหมายเพื่อการคัดเลือก และยีน β-glucuronidase (gus) เป็นยีนรายงานผล ในความเข้มข้น 3.33, 5 และ 10% (v/v) จากการเลี้ยงเชื้อในอาหารสูตร YM และนำมาเขย่ารวมกับยอดอ่อนเป็นเวลา 15 และ 30 นาที จากนั้นนำยอดอ่อนมาเพาะเลี้ยงในอาหารวุ้นสูตร MS ที่มี acetosyringone เข้มข้น 50 mM เป็นเวลา 2 วัน ก่อนนำมาเลี้ยงในอาหารคัดเลือกที่มี kanamycin เป็นเวลา 6 สัปดาห์ จากการนำต้นที่รอดชีวิตมาทำการตรวจสอบการแสดงออกของยีน gus พบว่าการใช้ A. tumefaciens สายพันธุ์ EHA105 ที่เข้มข้น 5% และเขย่ารวมกับยอดอ่อนนาน 15 นาที ทำให้ได้ต้นที่มียีนมากที่สุดคือ 63.16%
Other Abstract: Globba (Globba substrigosa Wall. ex Baker) is a promising ornamental plant that could benefit from further development using modern biotechnology. In this study, we developed the Agrobacterium-mediated transformation protocol into globba. The A. tumefaciens strain EHA105 harboring the binary vector pBI121 containing the neomycin phosphotransferase gene (nptII) as a selectable marker and the -glucuronidase (gus) gene as a reporter was cultured in YM medium. The bacteria was diluted to 3.33%, 5%, and 10% (v/v) with MS and 50 mM acetosyringone and incubated with in vitro propagated young globba shoots at 15 and 30 minutes. Treated shoots were selected in MS medium containing 50 mg/l kanamycin for 6 weeks. GUS bioassay was used to observe gus gene expression in leaves of transgenic plants. The results revealed that the highest percentage of transformed globba (63.16%) was obtained when in vitro globba shoots were inoculated with A. tumefaciens at the concentration of 5% for 15 minutes.
URI: https://ir.sc.mahidol.ac.th/handle/123456789/736
ISSN: 1906-7038
Appears in Collections:Plant Science: National Journal Publications

Files in This Item:
There are no files associated with this item.


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.