Please use this identifier to cite or link to this item: https://ir.sc.mahidol.ac.th/handle/123456789/239
Title: การพัฒนาการผลิตโพลีโคลนอลแอนติบอดีต่อ Cadmium-Binding Protein จากปลากะพงขาว (Lates calcarifer, Bloch) และการนำไปประยุกต์ใช้
Other Titles: Development and production of polyclonal antibody to cadmium-binding protein from sea bass (Lates calcarifer, bloch) and its application
Authors: สุกานดา ทับเมฆา
ปภาศิริ บาร์เนท
ชุติมา ถนอมสิทธิ์
Keywords: โพลีโคลนอลแอนติบอดี;ปลากะพงขาว
Issue Date: 2011
Publisher: คณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยนเรศวร
Citation: วารสารวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยนเรศวร. 8, 1 (2554): 32-43
Abstract: ปลากะพงขาว (Lates calcarifer, Bloch) ฉีดกระตุ้นด้วย CdNO3.4H2O ความเข้มข้น 4 มิลลิกรัมต่อน้ำหนักปลา 1 กิโลกรัม และแยก Cd-Binding Protein ที่สกัดจากตับโดยใช้วิธี Immobilized metalion affinity chromotagraphy โดยการผ่าน HisTrap FF crude column ศึกษารูปแบบของโปรตีนด้วยเทคนิคอิเล็กโทรโฟลิซิส พบว่าโปรตีนหลักมีขนาดมวลโมเลกุลประมาณ 10 kDa นำไปผลิตโพลีโคลนอลแอนติบอดีจำเพาะต่อ Cd-binding protein และทดสอบประสิทธิภาพของแอนติบอดี โดยใช้เทคนิค Western blot พบว่า การเจือจางแอนติบอดีที่เหมาะสม คือ 1:2,500 โดยมีการจับกันของแอนติบอดีกับโปรตีนที่ไม่จำเพาะอื่นค่อนข้างน้อย และพบแถบของ Cd-binding protein (~10 kDa) ค่อนข้างชัดเจน เมื่อนำมาประยุกต์ใช้สำรวจการสัมผัสสารเหนี่ยวนำการสร้าง Cd-binding protein ในปลาทะเล บริเวณชายฝั่งทะเลเขตพื้นที่อุตสาหกรรมพบว่า บริเวณนิคมอุตสาหกรรมมาบตาพุดมีการแสดงออก 48.6% (n=148) สูงกว่านิคมอุตสาหกรรมแหลมฉบัง ซึ่งพบ 29.1% (n=158) และเมื่อเปรียบเทียบตามฤดูกาล ฤดูแล้งพบ 51.3% (n=158) และฤดูฝน 25.0% (n=148) การนำโพลีโคลนอลแอนติบอดีต่อ Cd-binding protein จากปลากะพงขาวมาใช้สำรวจการสัมผัสสารเหนี่ยวนำการสร้าง Cd-binding protein ในปลาทะเล บริเวณชายฝั่งท้ะลเขตพื้นที่อุตสาหกรรมทำให้ทราบสถานการณ์การปนเปื้อนของโลหะหนักบริเวณแนวชายฝั่งทะเล
Other Abstract: Asian sea bass (Lates calcarifer, Bloch) was injected with CdNO3.4H2O (4 mg/ 1kg fish) and then Cadmium-Binding Protein was extracted from its liver by Immobilized metal ion affinity chromatography method for further using to produce polyclonal antibody specific to Cd-Binding Protein (PAb-Cd). After Electrophoresis studied, it was found that the molecular weight was 10 kDa. The PAb-Cd specificity was tested by Western blot technique. The results indicated that the appropriate dilution was 1:2,500 in which the Cd-binding protein band was clearly detected. After that this polyclonal antibody was used to evaluate the expression level of Cd-binding protein in marine fish. It was found that its expression in the marine fish collected from Map Ta Phut industrial estate (Rayong Province) was higher than that of fish collected from Laemchabang industrial estate (Chon Buri Province); 48.6% (n=148) and 29.1% (n=158), respectively. Higher expression of Cd-binding protein in fish was revealed during summer in comparison with rainy season; 51.3% (n=158) and 25.0% (n=148). Polyconal antibody against to Cd-binding protein produced in the Asian sea bass can be used to monitor the pollution situation in coastal industrial area
URI: http://ir.sc.mahidol.ac.th/handle/123456789/239
ISSN: 1686-5561
Appears in Collections:NCOE: National Journal Publications

Files in This Item:
There are no files associated with this item.


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.